Эксπир
Регистрация / Вход

Альтернатива антибиотикам – лизоцимы вирусов бактерий

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Проект
02.512.11.2026
Руководитель работ
Цыганков Юрий Дмитриевич
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
4,5 млн
Внебюджетные средства
1,5 млн

работы должны проводиться в рамках критической технологии «Биомедицинские и ветеринарные технологии жизнеобеспечения и защиты человека и животных» Работы должны соответствовать по предполагаемому исполнению лучшим мировым стандартам. Создаваемый научно-технический задел должен обеспечивать в будущем проведение опытно-конструкторских и технологических работ на конкурентном уровне. Результаты работ должны способствовать дальнейшему инновационному развитию российских технологий в данном приоритетном направлении Программы.

Этапы проекта

1
27.02.2007 - 30.06.2007
В ходе выполнения научно-исследовательских работ сконструированы гибридные плазмиды, содержащие ген лизоцима бактериофага FMV в составе векторных плазмид для экспрессии в широком круге грамм-отрицательных бактерий, а также в векторах для внутриклеточного синтеза лизоцима в дрожжах и для секреции из дрожжевых клеток. Определён уровень экспрессии лизоцима в бактериальных и дрожжевых клетках.
Развернуть
2
01.07.2007 - 31.10.2007
В ходе выполнения научно-исследовательских работ сконструированы гибридные плазмиды, содержащие ген лизоцима бактериофага FMV в составе векторных плазмид для экспрессии в широком круге грамм-отрицательных бактерий, а также в векторах для внутриклеточного синтеза лизоцима в дрожжах и для секреции из дрожжевых клеток. Определён уровень экспрессии лизоцима в бактериальных и дрожжевых клетках.
В ходе выполнения работ по 2 этапу проекта было проведено сравнение эффективности различных способов экспрессии растворимого лизоцима фага FMV в двух дрожжевых системах. Для этого ген лизоцима был клонирован и экспрессирован в клетках S.cerevisiae и P.pastoris под контролем наиболее сильных и строго регулируемых промоторов GAL1 и AOX1, соответственно. Было показано, что в обоих системах экспрессии продукция лизоцима в виде секретируемого белка является гораздо более эффективной по сравнению с внутриклеточным накоплением. При этом клетки S.cerevisiae показали себя лучшими продуцентами белка по сравнению с P.pastoris. Разработан метод выделения и очистки соответствующего ферментоа. Оптимизированы условия культивирования рекомбинантных штаммов-продуцентов с использованием питательных сред различного состава и условий культивирования. Наработан и очищен до гомогеноого состояния образец лизоцима бактериофага FMV Pseudomonas aueruginosa с удельной активностью выше 800000 МЕ\мг белка. Показано, что лизоцим фага обладает высокой антибактериальной активностью в отношении синегнойной палочки. Разработанный метод очистки лизоцима из культуральной жидкости Saccharomyces cerevisiae дает высокий выход целевого фермента с высоким уровнем удельной активности, в 8-16 раз превышающем удельную активность лизоцима, выделенного и очищенного из белка куриных яиц.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы"

Программное мероприятие

1.2 Проведение проблемно-ориентированных поисковых исследований и создание научно-технического задела по технологиям в области наук о жизни
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
4,5 млн
Организация
ИМГ РАН
профинансировано
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
4,5 млн
профинансировано
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
4,3 млн
профинансировано
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Биомедицинские и ветеринарные технологии жизнеобеспечения и защиты человека и животных»
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
136
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Биомедицинские и ветеринарные технологии жизнеобеспечения и защиты человека и животных» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007 - 2008, 18 мес.
Бюджетные средства
70,4 млн
Количество заявок
21
Тема
Работы по проведению 2-ой очереди проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Биомедицинские и ветеринарные технологии жизнеобеспечения и защиты человека и животных» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007 - 2008, 18 мес.
Бюджетные средства
70,4 млн
Количество заявок
70
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
48
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Геномные и посттеномные технологии создания лекарственных средств» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
43