Эксπир
Регистрация / Вход

Создание селективных ингибиторов экспрессии генов, ответственных за развитие лейкозов на основе химически модифицированных siРНК, способных эффективно проникать и накапливаться в клетках

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Проект
02.512.11.2033
Организация
ИХБФМ СО РАН
Руководитель работ
Зенкова Марина Аркадьевна
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
4,5 млн
Внебюджетные средства
2,1 млн

Работы должны проводиться в рамках критической технологии «Геномные и посттеномные технологии создания лекарственных средств» Работы должны соответствовать по предполагаемому исполнению лучшим мировым стандартам. Создаваемый научно-технический задел должен обеспечивать в будущем проведение опытно-конструкторских и технологических работ на конкурентном уровне. Результаты работ должны способствовать дальнейшему инновационному развитию российских технологий в данном приоритетном направлении Программы.

Соисполнители

Этапы проекта

1
27.02.2007 - 30.06.2007
Проведен анализ научно-технической литературы, относящейся к разрабатываемой теме и написан обзор по теме: «Структурные и термодинамические особенности индукторов РНК-интерференции».
Проведены сбор материала и обработка данных по молекулярно-биологическим маркерам лейкозов и лимфом. Показано, что общая выживаемость больных с неходжскинскими злокачественными лимфомами коррелирует с количеством опухолевых клеток, экспрессирующих bcl2, p53, c-myc, CD95 и p-gp: в группе пациентов с сочетанной гиперэкспрессией этих маркеров уровень общей выживаемости был в 4.5 раза ниже, чем в случаях, при которых эти маркеры отсутствуют.
На основе исследования деградации siРНК и их модифицированных аналогов в среде с сывороткой сформулирован алгоритм адресного введения химических модификаций, позволяющий получать siРНК, обладающие повышенной нуклеазоустойчивостью.
Синтезированы производные нуклеазоустойчивых siРНК, содержащие на 5’-конце смысловой цепи остаток холестерина. Показано, что наличие холестерина повышает эффективность трансфекции модифицированных siРНК в клетки линии НЕК 293, что сопровождается увеличением эффективности их ингибирующего действия (до 2.5 раз при концентрации 10 нМ).
Обнаружено, что проникновение олигонуклеотидов через клеточную мембрану может быть усилено путем образования молекулами олигонуклеотидов супрамолекулярных комплексов и их аккумуляции на поверхности клеток. Исследования внутриклеточной локализации и биологической активности комплексов, образованных доставляемым олигонуклеотидом и холестерин-модифицированным олигонуклеотидом второй цепи, показали, что данные комплексы достаточно равномерно распределяются в цитоплазме клетки, не цитотоксичны и не вызывают неспецифического ответа клеток. Результаты исследования показывают, что формирование целевым антисмысловым олигонуклеотидом самоорганизующейся супрамолекулярной структуры значительно повышает эффективность его транспорта через клеточную мембрану без использования каких-либо вспомогательных трансфецирующих соединений и позволяет достичь специфического подавления экспрессии гена-мишени.
Развернуть
2
01.07.2007 - 31.10.2007
В ходе выполнения проекта проведены ориентированные фундаментальные исследования, направленные на исследование генов, ответственных за развитие лейкозов, изучение их взаимодействия и прогностической значимости и создание эффективных средств подавления их экспрессии.
Сформулирован алгоритм адресного введения химических модификаций, позволяющий получать siРНК, обладающие повышенной нуклеазоустойчивостью. Алгоритм адресного введения химических модификаций использован для получения «вилко-подобных» siРНК и siРНК с легкоплавким центром. Обнаружено, что формирование олигонуклеотидами супрамолекулярных структур повышает их способность связываться с клетками. Показано, что олигонуклеотиды в составе модифи-цированных супрамолекулярных комплексов, несущих холестерин, эффек-тивно проникают внутрь клеток и вызывают специфическое подавление экспрессии гена мишени. Полученные на модельных системах данные использованы для получения ингибиторов экспрессии генов, ответственных за возникновение лейкозов AML и AML-ETO.
Проведен патентный анализ по тематике, связанной с работами по проекту, который показал, что объект исследования обладает патентной чистотой в отношении России, Великобритании, Германии, США, Франции и Японии. В отношении других стран патентная чистота не проверялась в связи с отсутствием полностью укомплектованных патентных фондов.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы"

Программное мероприятие

1.2 Проведение проблемно-ориентированных поисковых исследований и создание научно-технического задела по технологиям в области наук о жизни
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
4,5 млн
Организация
ИОГен РАН
профинансировано
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
4,5 млн
Организация
ИБМХ
профинансировано
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Геномные и посттеномные технологии создания лекарственных средств» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
43
Тема
Работы по проведению 2-ой очереди проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Геномные и посттеномные технологии создания лекарственных средств» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007 - 2008, 18 мес.
Бюджетные средства
70,4 млн
Количество заявок
27
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
48
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Биомедицинские и ветеринарные технологии жизнеобеспечения и защиты человека и животных»
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
136
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Технологии биоинженерии» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
49