Эксπир
Регистрация / Вход

Разработка технологии переноса Т-ДНК в генеративные клетки кукурузы

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Проект
02.512.11.2072
Организация
ИБФРМ РАН
Руководитель работ
Чумаков Михаил Иосифович
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
2 млн
Внебюджетные средства
0,2 млн

Работы должны проводиться в рамках критической технологии «Технологии биоинженерии». Работы должны соответствовать по предполагаемому исполнению лучшим мировым стандартам. Создаваемый научно-технический задел должен обеспечивать в будущем проведение опытно-конструкторских и технологических работ на конкурентном уровне. Результаты работ должны способствовать дальнейшему инновационному развитию российских технологий в данном приоритетном направлении Программы.

Этапы проекта

1
27.02.2007 - 30.06.2007
Объектами исследования являются генеративные клетки кукурузы.
Целью работы является создание эффективной технологии получения трансгенных растений путем агробактериальной трансформации генеративных клеток.
Проведены патентные поиски наиболее близких аналогов, в том числе международных патентных базах: всемирной организации интеллектуальной собственности, патентов США, начиная с 1976 по настоящее время, патентной базе Роспатента.
Написан и опубликован обзор методических работ в заявленном в проекте направлении в журнале Transgenic Plant Journal.
Отработаны молекулярно-генетические методы локализации Т-ДНК в геноме растения и клетках женского гаметофита, подготовлено к публикации методическое пособие. Для переноса генетических конструкций в составе Т-ДНК агробактерий оптимизирована температура индукции генов вирулентности и температура коинкубации, время последующего опыления.
Развернуть
2
01.07.2007 - 31.10.2007
1. Цель и задачи этапа работ:
Целью работы является отработка молекулярно-генетических методов локализации Т-ДНК в геноме растения и клетках женского гаметофита и подбор условий и порядка обработки агробактерий клеток женского гаметофита кукурузы с целью создания эффективной технологии получения трансгенных растений кукурузы путем агробактериальной трансформации генеративных клеток.
2. Работы, выполненные на отчетном этапе:
  Методами флуоресцентной микроскопии и ПЦР-анализа определялась локализации гена gfp и Т-ДНК в тканях проростков кукурузы после агробактерильной трансформации женского гаметофита. Произведен подбор условий и порядка ко-культивирования агробактерий с клетками мужского и женского гаметофита кукурузы. Произведены исследования влияния длины пестичных нитей на эффективность трансформации. Произведен анализ тотальной ДНК растений кукурузы первого и второго поколений с помощью ПЦР-анализа на наличие вставок Т-ДНК в геном.
3. Результаты
Получены экспериментальные доказательства встройки Т-ДНК в яйцеклетки кукурузы и определен интервал попадания прорастающих пыльцевых трубок в завязь кукурузы по пестичным нитям. Методами флуоресцентной микроскопии и ПЦР-анализа подтверждена локализации гена gfp и Т-ДНК в тканях проростков кукурузы после агробактерильной трансформации женского гаметофита. Произведен анализ тотальной ДНК кукурузы с помощью ПЦР-анализа на наличие вставок Т-ДНК в геном, установлен процент ПЦР-позитивных растений.
Экспериментальные результаты, полученные в ходе выполнения 1-го и 2-го этапов работы, обобщены и представлены в виде двух заявок на патенты, опубликовано три экспериментальные статьи и одно методическое пособие, подготовлены к печати 2 статьи, экспериментальные материалы доложены на трех международных и одной Российской конференциях.
На основании полученных результатов и анализа литературы составлен и оформлен итоговый отчет и вся необходимая отчетная документация. Разработана технология трансформации женского гаметофита кукурузы.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы"

Программное мероприятие

1.2 Проведение проблемно-ориентированных поисковых исследований и создание научно-технического задела по технологиям в области наук о жизни
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
4,5 млн
Организация
ИМБ РАН
профинансировано
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Технологии биоинженерии» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
49
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
48
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Биомедицинские и ветеринарные технологии жизнеобеспечения и защиты человека и животных»
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
136
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Геномные и посттеномные технологии создания лекарственных средств» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
43
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области индустрии наносистем и материалов по критической технологии «Нанотехнологии и наноматериалы» (мероприятие1.3 Программы)
Продолжительность работ
2007, 7 мес.
Бюджетные средства
92 млн
Количество заявок
241