Эксπир
Регистрация / Вход

Создание универсальных стимулирующих изоляторов для достижения высокого и стабильного уровня наработки целевых белков в культурах клеток и в тканях млекопитающих.

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Проект
02.512.11.2075
Организация
ИБГ РАН
Руководитель работ
Георгиев Павел Георгиевич
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
4,5 млн
Внебюджетные средства
0,65 млн

Работы должны проводиться в рамках критической технологии «Технологии биоинженерии». Работы должны соответствовать по предполагаемому исполнению лучшим мировым стандартам. Создаваемый научно-технический задел должен обеспечивать в будущем проведение опытно-конструкторских и технологических работ на конкурентном уровне. Результаты работ должны способствовать дальнейшему инновационному развитию российских технологий в данном приоритетном направлении Программы.

Этапы проекта

1
26.02.2007 - 31.03.2007
Разработан дизайн генно-инженерных конструкций, содержащих стимулирующих изоляторов (СИ- элементы), на основе которого созданы конструкции.

Клонирован промотор гистона Н2В. Создана конструкция для экспрессии целевого белка (антитела Ig-HER) в молочной железе трансгенных животных.

Проведен сиквенс полученных конструкций, подтверждена правильность их клонирования

Получены контрольные трансгенные линии мышей, содержащие конструкцию для продукции целевого белка, но не содержащие СИ- элементов, и измерено содержание целевого белка в молоке этих мышей.
Развернуть
2
01.04.2007 - 31.10.2007
Основная задача проекта - создание нового класса регуляторных элементов, названных стимулирующими изоляторами (СИ), которые могут максимально повысить экспрессию трансгена в клетках эукариот и молочных железах млекопитающих.
На первом этапе проекта были подобраны и созданы первые варианты СИ-элементов, которые затем были размещены в линейных и лентивирусных векторах для последующей трансформации культуры клеток и создания трансгенных мышей. Были получены контрольные трансгенные линии мышей, содержащие конструкцию для продукции целевого белка, но не содержащие СИ- элементы и измерено содержание целевого белка в молоке этих мышей.
На втором этапе проекта полученные вектора, содержащие СИ-элементы типа А, были трансфецированы в культуры клеток в виде линеаризованных плазмид и в составе лентивирусов. В культурах клеток, содержащих трансгенные конструкции, был проанализирован уровень экспрессии гена eGFP при помощи проточной цитофлуориметрии. В контрольных трансгенных линиях мышей, содержащих конструкцию без СИ- элементов для продукции целевого белка, измерено содержание целевого белка в молоке этих мышей. Получены трансгенные линии мышей, содержащие конструкцию с СИ-элементами для продукции целевого белка.
В результате за отчетный период были созданы удобные тест-системы для анализа активности сложных СИ-элементов и их составных частей. Из шести протестированных СИ-элементов первого поколения были выбраны два, наиболее эффективно поддерживающих высокую экспрессию трансгена. Полученные результаты позволят разработать более эффективные СИ-элементы.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы"

Программное мероприятие

1.2 Проведение проблемно-ориентированных поисковых исследований и создание научно-технического задела по технологиям в области наук о жизни
Продолжительность работ
2007, 7 мес.
Бюджетные средства
2 млн
Организация
ИФП СО РАН
профинансировано
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Технологии биоинженерии» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
49
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
48
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Биомедицинские и ветеринарные технологии жизнеобеспечения и защиты человека и животных»
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
136
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Геномные и посттеномные технологии создания лекарственных средств» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
43
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области индустрии наносистем и материалов по критической технологии «Нанотехнологии и наноматериалы» (мероприятие1.3 Программы)
Продолжительность работ
2007, 7 мес.
Бюджетные средства
92 млн
Количество заявок
241