Эксπир
Регистрация / Вход

Создание высокочувствительных технологий молекулярной диагностики вирусных и вироидных заболеваний растений для развития безвирусного растениеводства

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
4,45 млн
Внебюджетные средства
0,4 млн

Работы должны проводиться в рамках критической технологии «Технологии биоинженерии». Работы должны соответствовать по предполагаемому исполнению лучшим мировым стандартам. Создаваемый научно-технический задел должен обеспечивать в будущем проведение опытно-конструкторских и технологических работ на конкурентном уровне. Результаты работ должны способствовать дальнейшему инновационному развитию российских технологий в данном приоритетном направлении Программы.

Этапы проекта

1
26.02.2007 - 31.05.2007
Разработана МГА-ИФА-технология для диагностики вирусов и вироида картофеля. Для осуществления массовых диагностических анализов с помощью этой технологии разработан метод выделения вирусных и клеточных РНК, использующий диссоциацию вирусных и клеточных рибонуклеопротеидов с помощью нового нетоксичного хаотропного агента и сорбцию-десорбцию РНК на волокнах фильтровальной бумаги или хлопковой ваты для ее очистки. Получены рекомбинантные плазмиды, содержащие вставки кДНК вирусов Х, S, M, Y, A картофеля, вируса скручивания листьев картофеля, вироида веретеновидности клубней картофеля, а также вирусов аукуба-мозаики картофеля, вируса мозаики люцерны и вируса «mop top» картофеля. Эти плазмиды были клонированы в клетках E. coli, выделены в препаративных количествах и использованы для синтеза зондов путем мечения хлордиэтилентриаминоплатиной хлористой (диен-Pt).
Развернуть
2
01.06.2007 - 31.10.2007
В соответствии с Техническим заданием и Календарным планом на втором этапе проекта «Разработка технологии диагностики вирусных и вироидных заболеваний растений, основанной на молекулярной гибридизации вирусной РНК, меченной диен-Pt, с комплементарной ДНК, фиксированной на нитратцеллюлозной мембране (ДНК-микроплате), с последующим выявлением гетеродуплексов в ИФА» был создан способ мечения РНК диен-платиной и использования меченых производных РНК в реакции гибридизации с рекомбинантными кДНК, фиксированными на нитратцеллюлозной мембране (ДНК-микроплате). ДНК-микроплата позволяет определять вирусную РНК с чувствительностью не менее 5 пг РНК вируса или вироида в 1 мкл экстракта; продолжительность анализа (одновременно до 5 образцов) составляет не более 3 суток; срок годности препаратов РНК, меченных диен-платиной, и ДНК-микроплат – не менее 6 мес при хранении при -20°С. Применение ДНК-микроплаты, в отличие от всех известных методов, дает возможность одновременной диагностики вирусов и вироида в анализируемом образце и позволяет обеспечить, значительно ускорить и существенно удешевить процедуру сертификации семенного картофеля.
ДНК-микроплата может быть использована для одновременной диагностики основных вирусов и вироида картофеля в уникальных (например, коллекционных) сортообразцах для определения их фитосанитарного статуса, для контроля эффективности оздоровления от вирусов и вироида и т.п. ДНК-микроплата позволяет повысить эффективность диагностического анализа пропорционально количеству ячеек, содержащих соответствующую рекомбинантную ДНК со вставкой кДНК вироида или вируса. Такая работа может представлять собой особую важность в связи с началом работ по созданию в РФ генобанка здоровых сортов картофеля.
ДНК-микроплата, созданная при выполнении настоящего проекта, может являться прототипом для конструирования ДНК-микроплат для диагностики вироидных и вирусных инфекций любого экономически важного с/х растения, а также использована для диагностики вирусов животных
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы"

Программное мероприятие

1.2 Проведение проблемно-ориентированных поисковых исследований и создание научно-технического задела по технологиям в области наук о жизни
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
3,02 млн
Организация
ИНЦ РАН
профинансировано
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Технологии биоинженерии» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
49
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
48
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Биомедицинские и ветеринарные технологии жизнеобеспечения и защиты человека и животных»
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
136
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Геномные и посттеномные технологии создания лекарственных средств» (мероприятие 1.2 Программы)
Продолжительность работ
2007, 8 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
43
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области индустрии наносистем и материалов по критической технологии «Нанотехнологии и наноматериалы» (мероприятие1.3 Программы)
Продолжительность работ
2007, 7 мес.
Бюджетные средства
92 млн
Количество заявок
241