Эксπир
Регистрация / Вход

Экспрессия в растениях с помощью вирусов-вектров белков медицинского назначения: вакцинных белков вируса гриппа и миелоцитокинов человека

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Продолжительность работ
2007 - 2008, 16 мес.
Бюджетные средства
17,6 млн
Внебюджетные средства
3,65 млн

Разработка методов экспрессии рекомбинантных белков в растениях на основе самореплицирующихся вирусных векторов

Соисполнители

Предложения

Разработка и анализ эффективности пептидных рекомбинантных противоаллергенных вакцин
Тема
Разработка и анализ эффективности пептидных рекомбинантных противоаллергенных вакцин
Входящий номер
3668
Организация
ИБХ РАН
Руководитель организации-инициатора
Иванов Вадим Тихонович
Разработка научно-обоснованных методов повышения эффективности аэрозольных лекарственных средств, включающих рекомбинантные белки
Тема
Разработка научно-обоснованных методов повышения эффективности аэрозольных лекарственных средств, включающих рекомбинантные белки
Входящий номер
1763
Руководитель организации-инициатора
Симбирцев Андрей Семенович
 Показать еще 8 предложений
 Скрыть другие предложения

Этапы проекта

1
22.06.2007 - 07.12.2007
Целью НИР является разработка методов экспрессии рекомбинантных белков в растениях, основанных на использовании самореплицирующихся вирусных векторов, и их применение для продукции в растениях вакцинных белков вируса гриппа (ВГ) и миелоцитокинов человека, - гранулоцитарного колониестимулирующего фактора роста человека (Г-КСФ) и гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (ГМ-КСФ).
Созданы новые самореплицирующиеся векторы на основе геномов вируса табачной мозаики и Х-вируса картофеля для экспрессии целевых белков (ЦБ). Выделены и клонированы гены вакцинных белков вируса гриппа. Сконструирован полногеномный вектор на основе ВТМ, содержащий «слитую» структуру гена белка оболочки (БО) типа «5’-БО ВТМ - линкер – вирусный антиген-3'». Создан вирусный вектор, обеспечивающий экспрессию рекомбинантных вирусоподобных частиц на основе ядерного антигена вируса гепатита В, несущий в своем составе домен белка М2 ВГ.
Впервые доказана возможность стабильной экспрессии в растениях генноинженерных вариантов фрагментов гемагглютинина, несущих нейтрализующие эпитопы, с использованием вирусных векторов. Это открывает перспективу для использования растений как биореакторной системы, позволяющей производить полиэпитопные вакцинные белки с наименьшими затратами.
Отработаны условия введения вируса-вектора в растительные клетки методом агроиннъекции, показана суперпродукция ЦБ в ряде растений, в том числе.
. Сконструированы продуценты, обеспечивающие высокий уровень синтеза Г-КСФ и ГМ-КСФ человека; получены поликлональные антитела к ним. Произведено выделение очищенных препаратов Г-КСФ из растений. Показана колоние-стимулирующая активность растительного препарата Г-КСФ
В ходе выполнения I этапа НИР все поставленные задачи решены в полном объеме в соответствии с техническим заданием Государственного контракта от «22» июня 2007г. № 02.512.11.2103_
Развернуть
2
01.01.2008 - 31.05.2008
Получен фитовирусные векторы, способные направлять в растениях синтез химерных частиц, несущих на своей поверхности встроенный M2e эпитоп вируса гриппа человека.
  Разработан метод выделения и очистки химерных вирусов.
  Отработан метод подавления антивирусной реакции клетки с помощью новых белков-усилителей экспрессии рекомбинантных белков в составе вирусных векторов.
  Получены антитела к рекомбинантным ГМ-КСФ человека.
  Разработана технология агроинфицирования растений, культивированных в системе аэропоники с применением бинарных векторов, позволяющая получить продукцию ЦБ в корнях съедобных растений на высоком уровне за короткий период времени.
  Выделены и очищены рекомбинантные вирусоподобные частицы
Развернуть
3
01.06.2008 - 31.10.2008
3.1 Накопление и очистка вакцинных препаратов на основе химерного фитовируса.
Характеристика иммуногенности вакцинных препаратов химерного фитовируса по уровню продукции антител к белку М2 ВГ и/или другим (контрольным) антигенам.
3.2. Накопление биомассы в опыте по суперпродукции в растении ЦБ с последующим его препаративным выделением .
3.3. Анализ антигенного ответа у животных в зависимости от дизайна полиэпитопных вакцинных белков на основе ГВПГ.
3.4. Суперпродукция в растениях цитокина ГМ-КСФ, выделение очищенных препаратов и определение
активности ГМ-КСФ растительного происхождения.
3.5. Структурная и иммунологическая характеристика вирусоподобных частиц, формируемых из рекомбинантного гибрида
ядерного антигена вируса гепатита В,
содержащего поверхностный домен М2Е вакцинного белка М2 вируса гриппа (структура, иммуногенность).
3.6. Функциональная характеристика Г-КСФ и других целевых белков на основе комбинаторных библиотек потенциальных лиган-дов.
3.7. Составление итогового отчёта.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы"

Программное мероприятие

1.2 Проведение проблемно-ориентированных поисковых исследований и создание научно-технического задела по технологиям в области наук о жизни
Тема
Новые системы экспрессии в растениях рекомбинантных белков медицинского назначения
Продолжительность работ
2007 - 2008, 16 мес.
Бюджетные средства
35,2 млн
Количество заявок
2
Тема
Доклинические исследования противогриппозной вакцины широкого спектра действия на основе рекомбинантных пседоаденовирусных частиц, экспрессирующих гены эктодоменов белка М2 вируса гриппа А, с молекулярным адъювантом.
Продолжительность работ
2012 - 2014, 24 мес.
Бюджетные средства
33 млн
Количество заявок
1
Тема
Транспортные белки вирусов как ключевые участники распространения вирусной инфекции в растениях: функции и структурная организация транспортных РНК хеликаз.
Продолжительность работ
2008, 3 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
Количество заявок
1
Тема
Создание инновационных наборов реагентов для обеспечения эффективного контроля за возбудителями болезней сельскохозяйственных растений, кандидатных вакцин на основе структурно модифицированных вирусов растений и генетических конструкций для повышения устойчивости к возбудителям болезней сельскохозяйственных животных или растений
Продолжительность работ
2013, 2 мес.
Бюджетные средства
16 млн
Количество заявок
8
Тема
Доклинические исследования противовирусного препарата пептидной природы, подавляющего репликацию вирусов гриппа человека А (H1N1)
Продолжительность работ
2016 - 2018, 26 мес.
Бюджетные средства
33 млн
Количество заявок
0