Эксπир
Регистрация / Вход

Структура, динамика и стабильность лиганд-связывающих белков как чувствительных элементов социально-значимых биосенсоров

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Проект
02.512.11.2108
Организация
ИНЦ РАН
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
Внебюджетные средства
0,58 млн

В результате выполнения каждой работы должен быть создан необходимый научно-технический задел, обеспечивающий переход к проведению опытно-конструкторских работ с целью последующей коммерциализации

Этапы проекта

1
25.06.2007 - 19.11.2007
Выделены, очищены и охарактеризованы биохимически D-галактозо/D-глюкозо -связывающий белок из E.coli (GGBP), и его мутантная форма M18C, глу-тамин-связывающий белок из E.coli (GlnBP), и одор-связывающие белки из обоня-тельного эпителия свиньи (pOBP) и рекомбинантный белок быка, полученный в бактериальной системе E. coli (bOBP). Выполнен анализ пространственной струк-туры этих белков, свойств микроокружения и особенностей локализации трипто-фановых остатков, ответственных за их собственную флуоресценцию. Изучены флуоресцентные характеристики белков и их комплексов с лигандами. Показано, что хотя комплексообразование с лигадами существенно изменяет пространствен-ную структуру белков, их флуоресцентные характеристики изменяются незначи-тельно. Сделано заключение о том, что при использовании этих белков в качестве чувствительных элементов биосенсорных систем следует использовать белки, ме-ченые внешними флуоресцентными красителями, либо использовать метод по-верхностного плазмонного резананса.
Охарактеризована стабильность исследованных белков к денатурирующему действию гуанидингидрохлорида и нагревания. Определена разность свободных энергий этих белков в нативном и развернутом состояниях (в отсутствие денату-ранта). Отмечена высокая стабильность одор-связывающего белка, присущая бел-кам типа бета-бочонка. Во всех случаях установлено стабилизирующее действие лигандов на структуру белков. Отмечено, что присоединение лигандов делает про-цесс денатурации белка более кооперативным. Разработана методика анализа про-цесса необратимой тепловой денатурации белков, основанная на измерении дена-турационных кривых при различной скорости нагрева образца и при различном со-держании в растворе химического денатуранта.
Результаты НИР, проведенной при выполнении государственного контракта,
будут использованы при создании чувствительных элементов социально значимых
биосенсоров. Основные научные достижения и методические разработки
используются членами коллектива Школы в практических занятиях и курсах
лекций для студентов СПбГПУ и СПбГУ. К выполнению работы было привлечено большое число молодых сотрудников Института, в том числе два аспиранта и три студента старших курсов СПбГПУ и СПбГУ. Результаты проведенных исследова-ний будут использованы в их диссертационных работах.
По разрабатываемой тематике совместно с Институтом биохимии белка (Не-аполь) опубликовано 9 статей, в том числе 4 в отчетный период.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы"

Программное мероприятие

1.2 Проведение проблемно-ориентированных поисковых исследований и создание научно-технического задела по технологиям в области наук о жизни
Продолжительность работ
2007 - 2008, 18 мес.
Бюджетные средства
17,6 млн
профинансировано
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
профинансировано
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Клеточные технологии» (мероприятие 1.2. Программы).
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
15,6 млн
Количество заявок
16
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Технологии биоинженерии» (мероприятие 1.2. Программы).
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
10,8 млн
Количество заявок
14
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Биокаталитические, биосинтетические и биосенсорные технологии» (мероприятие 1.2. Программы).
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
4,8 млн
Количество заявок
9
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Биомедицинские и ветеринарные технологии жизнеобеспечения и защиты человека и животных» (мероприятие 1.2. Программы).
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
18 млн
Количество заявок
40
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Геномные и постгеномные технологии создания лекарственных средств» (мероприятие 1.2. Программы).
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
8,4 млн
Количество заявок
6