Эксπир
Регистрация / Вход

Анализ механизмов транспорта иммуноактивных медиаторов через кишечный эпителий на модели трансгенных растений моркови с генами интерлейкинов 10 и 18 человека для пероральной доставки иммунорегуляторных препаратов

В результате выполнения каждой работы должен быть создан необходимый научно-технический задел, обеспечивающий переход к проведению опытно-конструкторских работ с целью последующей коммерциализации

Этапы проекта

1
25.06.2007 - 20.11.2007
За время выполнения работ, в соответствии с календарным планом, были получены следующие результаты:
Разработана схема и осуществлено генно-инженерное конструирование генов гибридных белков на основе генов интерлейкина 10 и интерлейкина 18 человека, клонированных нами ранее методом РТ-ПРЦ из мононуклеарных клеток периферической крови человека, и геном зеленого флюоресцентного белка GFP c использованием плазмиды pET28a(+). Разработанная схема модифицирована для клонирования соответствующих генов в плазмиду pET32a(+). Проведен анализ соответствия состава нуклеотидных последовательностей созданных генетических конструкций. Осуществлен перенос созданных генетических конструкций с генами интерлейкинов 10 и 18 человека и геном зеленого флюоресцентного белка GFP в клетки E.coli (штамм BL21(DE3). Рекомбинантные белки ИЛ-10 и ИЛ-18 выделены в нерастворимой форме.
Для экспрессии слитых белков IL10-GFP и IL18-GFP в растениях разработана схема клонирования и осуществлено генно-инженерное конструирование генов гибридных белков на основе генов интерлейкина 10 и интерлейкина 18 человека, клонированный нами ранее. Конструирование проведено в два этапа с получением необходимой целевой последовательности в плазмиде pBSK с добавлением промотора P35S вируса мозаики цветной капусты и последовательности PolyA с последующим переносом в вектор pBIN для трансформации растений.
Отработаны методы выделения, иммунофенотипирования и культивирования клеток эпителиального слоя тонкого кишечника, проведена серия экспериментов по иммуноокрашиванию эпителиальных клеток тонкого кишечника для детекции рекомбинантных белков ИЛ-10 и ИЛ-18. На основе полученных данных предложена модель для изучения механизмов транспорта иммуноактивных медиаторов через клетки тонкого кишечника, представляющая собой апикальные части эпителиальных клеток ворсинок тонкого кишечника.
По теме выполняемых работ проведены патентные исследования.
Полученные результаты представляют интерес при разработке технологической платформы создания биофармацевтиков на основе генетически модифицированных трансгенных растений.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы"

Программное мероприятие

1.2 Проведение проблемно-ориентированных поисковых исследований и создание научно-технического задела по технологиям в области наук о жизни
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Биомедицинские и ветеринарные технологии жизнеобеспечения и защиты человека и животных» (мероприятие 1.2. Программы).
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
18 млн
Количество заявок
40
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Клеточные технологии» (мероприятие 1.2. Программы).
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
15,6 млн
Количество заявок
16
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Технологии биоинженерии» (мероприятие 1.2. Программы).
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
10,8 млн
Количество заявок
14
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Биокаталитические, биосинтетические и биосенсорные технологии» (мероприятие 1.2. Программы).
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
4,8 млн
Количество заявок
9
Тема
Работы по проведению проблемно-ориентированных поисковых исследований и созданию научно-технического задела в области живых систем по критической технологии «Геномные и постгеномные технологии создания лекарственных средств» (мероприятие 1.2. Программы).
Продолжительность работ
2007, 5 мес.
Бюджетные средства
8,4 млн
Количество заявок
6