Эксπир
Регистрация / Вход

Изучение механизмов сегрегационной стабильности линейных репликонов и создание на их основе экспрессионных векторов для целей биотехнологии

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Проект
02.512.11.2181
Руководитель работ
Летаров Андрей Викторович
Продолжительность работ
2007 - 2008, 14 мес.
Бюджетные средства
1,5 млн
Внебюджетные средства
1,5 млн

Информация отсутствует

Предложения

Создание медицинского препарата для лечения гепатитов, в том числе гепатита С
Тема
Создание медицинского препарата для лечения гепатитов, в том числе гепатита С
Входящий номер
6227
Организация
ФГБОУ ВО "ИрНИТУ"
Руководитель организации-инициатора
Афанасьев Александр Диамидович
Разработка новых блокаторов Р7 ионного канала вируса гепатита С и аналогичных протеинов других вирусов на основе направленного синтеза каркасных структур.
Тема
Разработка новых блокаторов Р7 ионного канала вируса гепатита С и аналогичных протеинов других вирусов на основе направленного синтеза каркасных структур.
Входящий номер
6290
Организация
ФГБОУ ВО "СамГТУ"
Руководитель организации-инициатора
Быков Дмитрий Евгеньевич
 Показать еще 30 предложений
 Скрыть другие предложения

Этапы проекта

1
01.08.2007 - 15.11.2007
Таким образом, внедрение создаваемых векторов повышенной стабильности может решить проблему очистки производимого рекомбинантного белка от следов антибиотика, которые могут представлять опасность для здоровья людей и животных (в частности вызывать их аллергическую сенсибилизацию). Кроме того, исключение из технологического цикла процедуры очистки целевого продукта от следов антибиотика позволит существенно удешевить производство единицы рекомбинантного белка.
Главной задачей первого этапа выполнения проекта (август - ноябрь 2007г.) являлся выбор направления исследований. Анализ научно-технической литературы и других материалов, относящихся к разрабатываемой теме показал, что выбранный подход к решению проблемы стабильного наследования экспрессионных векторов в условиях производства является верным, поскольку в природных популяциях энтеробактерий токсин-антитоксиновые модули обеспечивают достаточно высокую степень стабилизации репликонов. При изучении нормативно-технической документации особое внимание было уделено анализу документов по правилам безопасности при работе с рекомбинантными ДНК и микроорганизмами, включая генетически измененные микроорганизмы.
На первом этапе проекта был проведён скрининг природных популяций энтеробактерий из кишечника животных, в том числе подвергшихся воздействию фторхинолоновых антибиотиков, а также из сточных вод. Около 30-50% изолятов энтеробактерий в выбранных популяциях содержат природные плазмиды различной молекулярной массы. Проведённая ПЦР-детекция показала наличие в их составе ряда токсин-антитоксиновых кассет. Это подтверждает правильность выбора источников природных штаммов так как по литературным данным известно, что распространённость многих из этих модулей не очень высока и их амплификация из природного материала требует значительных усилий.
Второй задачей первого этапа работы являлся анализ эффективности функционирования системы сегрегационной стабильности фага N15 в кольцевых и линейных векторах с различным числом копий. Мы установили, что экспрессия генов sop оперона фага N15, обеспечивает стабильное наследование ранее сконструированных нами низкокопийных кольцевых экспрессионных векторов на основе репликона N15 в отсутствии селектирующего антибиотика в среде. Сконструированы линейные векторы на основе репликонов фагов N15 и Р1, содержащие сегрегационный модуль parAB фага Р1.
Проведены патентные исследования, на основании которых сделан вывод о патентной чистоте ожидаемых практических результатов проекта.
Развернуть
2
16.11.2007 - 31.12.2007
В ходе выполнения первого этапа календарного плана государственного контракта
проведены следующие работы: (1) Продолжение анализа эффективности функционирования системы сегрегационной стабильности фага N15 в кольцевых и линейных векторах с различным числом копий.
(2) Идентификация и отбор генов и оперонов, определяющих стабильность наследования плазмид в природных популяциях энтеробактерий.
(3) Составление промежуточного отчета и его рассмотрение. Получены количественные оценки стабильности кольцевых и линейных векторов на основе репликона фага N15 с различным числом копий. Отобрано 3 клона, содержащих вставки, вызывающие стабилизацию наследования рекомбинантных плазмид в использованной системе скрининга.
Развернуть
3
01.01.2008 - 15.07.2008
Проведены сравнительные исследования стабилизации плазмид этими модулями с помощью ранее предложенной двухплазмидной системы и установлено, что ссd – подобный модуль обеспечивает наилучшую стабилизацию наследования вектора.
  На основе двух векторов, содержащих репликон фага N15, исследованных на предыдущем этапе получены два экспрессионных вектора, содеражащие данный токсин – антитоксиновый модуль.
Развернуть
4
16.07.2008 - 31.10.2008
Проведено тестирование эффективности созданных систем экспрессии на примере синтеза модельного гетерологичного белка.
  По результатам работы подготовлена и подана заявки на получение патента на изоборетение «Способ повышения стабильности наследования экспрессионных плазмидных векторов в клетках Escherihia coli».
  Иностранным партнёром выполнены по функциональной характеристике генетических систем, обеспечивающих стабильное наследование плазмид.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы"

Программное мероприятие

1.2 Проведение проблемно-ориентированных поисковых исследований и создание научно-технического задела по технологиям в области наук о жизни
Продолжительность работ
2005, 2 мес.
Бюджетные средства
0,42 млн
профинансировано
Тема
Выявление экспрессионных маркеров опухолевой клетки для ее направленной элиминации микробными РНКазами.
Продолжительность работ
2008 - 2009, 17 мес.
Бюджетные средства
7,8 млн
Количество заявок
1
Тема
Изучение молекулярно-клеточных механизмов сердечных заболеваний, ассоциированных с диабетом и избыточным весом.
Продолжительность работ
2009 - 2012, 38 мес.
Бюджетные средства
72 млн
Количество заявок
2
Тема
Изучение механизмов повышения резистентности функциональных систем при направленном изменении газовой среды
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
6 млн
Количество заявок
4
Тема
Изучение генетических основ и разработка биотехнологий получения растений с заданными свойствами, разработка методов оценки трансгенных растений на биобезопасность на установке: "Экспериментальная установка искусственного климата (УИЭК) (рег. № 2-2.23)"
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
4 млн
Количество заявок
1
Тема
Изучение механизмов прогрессии опухолей и создание новых методов подавления роста опухолей и метастазов, в том числе, с помощью комбинаторной терапии.
Продолжительность работ
2008, 3 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
Количество заявок
1