Эксπир
Регистрация / Вход

Комбинаторные подходы к созданию новых ингибиторов ключевых протеиназ развития нейродегенеративных и инфекционных заболеваний

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Проект
02.512.11.2208
Организация
ИБХ РАН
Руководитель работ
Габибов Александр Габибович
Продолжительность работ
2008 - 2009, 16 мес.
Бюджетные средства
7,8 млн
Внебюджетные средства
0,3 млн

Разработка новой платформы на основе методов биокатализа, белковой инженерии и биохимической кинетики комбинаторных подходов с использованием фагового дисплея и химических библиотек для определения механизмов ингибирования протеиназ антагонистами пептидной и непептидной природы и резистентности лекарственно-устойчивых мутантных форм ферментов, разработки экономичных и эффективных сенсоров детекции особо опасных патогенов.

Участники проекта

Зам. руководителя работ
Румш Лев Давыдович

Этапы проекта

1
03.07.2008 - 30.09.2008
Проведена сборка и экспрессия трех конструкций бета-секретазы (мемапсина-2).
  Впервые показана возможность получения белок мемапсина-2 в бактериальной системе экспрессии в растворимом и активном состоянии. Разработана одностадийная методика очистки рекомбинантного белка. Получены гомогенные препараты новой трипсиноподобной протеиназы (PSP) Serratia Proteamaculans.
Разработан метод разрушения комплекса шаперона GroEL и PSP. Установлено, что данный фермент является ранее не известной олигопептидазой В. Определено строение гена OpdB S. proteomaculans 94 и сконструирован штамм-продуцент E. coli BL-21 (DE3) pOpdB. Разработан метод выделения рекомбинантного белка.
  Сконструирована субстратная библиотека на основе нитевидного фага с использованием авидин-биотиновой схемы и сайт-специфического биотинилирования с уникальными свойствами, позволяющими селектировать эффективные субстраты для протеиназ с низкой каталитической эффективностью.Начаты работы по скринингу сконструированной библиотеки.
Развернуть
2
01.10.2008 - 31.12.2008
Осуществлен скрининг пептидов с использованием созданного биосе