Эксπир
Регистрация / Вход

Использование стволовых и прогениторных клеток из соматических тканей человека для восстановительной терапии и регенерации тканей

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Продолжительность работ
2007 - 2009, 31 мес.
Бюджетные средства
210 млн
Внебюджетные средства
117 млн

Разработать технологии восстановления поврежденных тканей человека с помощью трансплантации собственных стволовых клеток, полученных из соматических тканей

Соисполнители

Организация
Томский НИМЦ
Организация
ГНЦ РФ - ИМБП РАН
Организация
ИМБ РАН
Организация
ИНЦ РАН

Предложения

Создание живых тканевых эквивалентов для восстановления структуры и функции тканей на основе клеточных технологий
Тема
Создание живых тканевых эквивалентов для восстановления структуры и функции тканей на основе клеточных технологий
Входящий номер
4227
Организация
ИБР РАН
Руководитель организации-инициатора
Васильев Андрей Валентинович
Использование стволовых и прогениторных клеток соматических тканей для восстановительной терапии и регенерации тканей человека Факультет фундаментальной медицины Московского государственного университета им.М.В.Ломоносова
Тема
Использование стволовых и прогениторных клеток соматических тканей для восстановительной терапии и регенерации тканей человека Факультет фундаментальной медицины Московского государственного университета им.М.В.Ломоносова
Входящий номер
4240
Руководитель организации-инициатора
Ткачук Всеволод Арсеньевич
 Показать еще 7 предложений
 Скрыть другие предложения

Этапы проекта

1
27.04.2007 - 31.08.2007
Была выполнена оценка количества стволовых клеток сердца в ткани аневризмы левого желудочка сердца человека методом иммуногистохимического окрашивания. Была отработана методика выделения клеток-предшественников (с-kit+ клеток) из ткани аневризмы сердца, удаленной во время хирургического вмешательства методом иммуномагнитной селекции.
Было проведено исследование количества циркулирующих предшественников эндотелиальных клеток (ЦПЭК) и их субпопуляций у больных ишемической болезнью сердца до и после ангиопластики и определение прогностической значимости количества этих клеток для клинического течения заболевания после ангиопластики.
Была оптимизированы методики выделения стромальных клеток жировой ткани человека, мыши и крысы и определения пролиферативного потенциала и секреторной активности свежевыделенных и пассированных клеток.
Были разработаны протоколы клинического исследования безопасности и эффективности клеточной терапии инфаркта миокарда, хронической ишемической болезни сердца, хронической сердечной недостаточности с помощь интракоронарного, интрамиокардиального и внутривенного введения стволовых клеток костного мозга (мононуклеарной фракции и мезенхимальных клеток).
На основе кДНК цитопротекторных генов, а также промоторов генов кардиомиогенной и миогенной дифференцировки были сконструированы цитопротективные плазмидные конструкции, а также конструкции для индуцибельной или конститутивной экспрессии терапевтических генов.
Были оптимизированы процедуры выделения фибробластов из кожи, легких и сердца. Было выполнено сравнение морфологических характеристик полученных популяций фибробластов, а также способности этих клеток взаимодействовать с иммобилизованными белками внеклеточного матрикса.
Были оптимизированы протоколы культивирования стромальных клеток костного мозга животных и человека с целью индукции направленной (кардиомиогенной и хондрогенной) дифференцировки этих клеток.
Были разработаны технические условия на новый клеточный продукт для заместительной терапии кожи «Эквивалент кожи полный»
Была разработана технология культивирования МСК костного мозга лабораторных животных и индукции кардиомиогенной дифференцировки этих клеток.
Была Оптимизирована методика количественной оценки постинфарктного ремоделирования сердца у крыс и мышей.
Был оптимизирован способ пункции гребня подвздошной кости, получения аспирата костного мозга и выделения мононуклеарной фракции клеток костного мозга у больных инфарктом миокарда, дилатационной кардиомиопатией и постинфарктным кардиосклерозом и выбран оптимальный вариант протокола выделения и культивирования МСК из костного мозга человека.
Были Выбраны оптимальные условия культивирования МСК из костного мозга в условиях пониженного содержания кислорода.
Был разработан метод культивирования фибробластов дермы без применения сыворотки крупного рогатого скота.
Было проведено сравнение морфологических характеристик, пролиферативной и секреторной активности получаемыхклеточных популяций.
Были оптимизированы протоколы культивирования МСК, полученных из продуктов хирургического удаления жировых отложений, без применения сыворотки крупного рогатого скота, в условиях малого содержания сыворотки или с использованием аутологичной сыворотки донора.
Было выполнено сравнение морфологических характеристик МСК из костного мозга и жировой ткани
Развернуть
2
01.09.2007 - 31.12.2007
В результате выполнения этапа работы:
Начато рандомизированное исследование безопасности и эффективности клеточной терапии острого инфаркта миокарда, постинфарктном кардиосклерозе и хронической сердечной недостаточности (ХСН) с помощью внутрикоронарного введения аутологичной мононуклеарной фракции костного мозга (отбор, рандомизация, клинико-инструментальное обследование больных).
Проведено исследование количества различных субпопуляций циркулирующих предшественников эндотелиальных клеток у больных хронической ИБС и острым коронарным синдромом и сопоставление количества ЦПЭК с содержанием факторов ангиогенеза (VEGF, HGF) в крови этих больных.
Проведена проверка эффективности работы созданных генных конструкций, индуцируемых условиями гипоксии.
Отработаны методы получения кондиционированной среды, содержащей факторы кардиомиоцитарной дифференцировки и методов исследований направленной дифференцировки МСК.
Выполнен сравнительный анализ продукции белков внеклеточного матрикса фибробластами, выделенными из разных тканей (кожи, легких, сердца) и МСК костного мозга.
Разработаны методы ремоделирования внеклеточного матрикса металлопротеазами in vitro.
Исследовано присутствие колониеобразующих клеток в сердечной мышце после деструктивного поражения миокарда в эксперименте.
Разработано устройство для трансэндокардиальной доставки клеточного материала в миокард.
Разработан стандартный протокол для контроля получаемых культур (клеточных препаратов).
Выполнен анализ фенотипических характеристик МСК, культивируемых при разном содержании кислорода в среде.
Разработаны протоколы тестирования безопасности пассируемых культур фибробластов, предназначенных для аутологичной трансплантации.
Развернуть
3
01.01.2008 - 31.08.2008
Начато проведение клинических испытаний. Исследовано оптимальное количество вводимых клеток, проведен анализ их тканевого распределения. Разработаны оптимальные методы введения плазмидных и вирусных конструкций. Проведен анализ цитопротекторного действия разработанных конструкций. Разработана конструкторская документация для изготовления действующего макета устройства для интрамиокардиального введения стволовых клеток.
Развернуть
4
01.09.2008 - 31.12.2008
Получены результаты количественного сопоставления фракций циркулирующих клеток предшественников эндотелия у пациентоа страдающих ишемической болезнью сердца.
На животной модели исследована возможность терапевтического использования стволовых клеток выделяемых из удаляемой ткани аневризмы сердца человека.
Исследовано влияние созданных генных конструкций на кардиомиоцитарную дифференцировку стволовых клеток по экспрессии РНК и маркерных белков.
На животных моделях ишемии нижних конечностей и инфаркта миокарда исследовано тканевое распределение введенных в организм стволовых клеток трансфецированных цитопротективными конструкциями.
Разработана экспериментальная технология производства препаратов модифицированных и преддиференцированных стволовых клеток лабораторных животных.
Создан тканеинженерный эквивалент костной ткани с помощью индукции остеогенной дифференцировки стволовых клеток из костного мозга.
Проведены предварительные испытания нового образца дермального эквивалента, разработана и подготовлена к патентовании документация на новывй дермальный эквивалент.
Исследовано влияние трансплантации аутологичных мононуклеарных клеток костного мозга и аутологичных CD133+ клеток костного мозга на содержание в крови больных острым инфарктом миокарда фактора роста гепатоцитов, основного фактора роста фибробластов, фактора роста эндотелия сосудов, а также инсулиноподобного фактора роста;
Проведены стендовые испытания действующего макета устройства для трансэндокардиальной доставки клеточного материала;
Выполнен анализ возможных механизмов влияния длительного культивирования МСК в условиях пониженного содержания кислорода на функциональную активность этих клеток;
Разработаны программы предварительных испытаний МСК, культивируемых в условиях пониженного содержания кислорода, в лабораторных моделях in vivo;
Определены оптимальные концентрации МСК из жировой ткани и костного мозга в разрабатываемых суспензионных препаратах;
Подобраны среды и реактивы для приготовления клеточных препаратов, определены сроки и условия хранения препаратов.
Развернуть
5
01.01.2009 - 31.08.2009
Подготовлен регламент доклинических лабораторных испытаний модифицированных и преддифференцированных МСК. Проведены доклинические лабораторные испытания препаратов МСК, экспрессирующих цитопротекторные гены, а также препаратов МСК, преддифференцированных в кардиомиоцитарном направлении.Создана полимерная биодеградируемая матрица для культивирования и трансплантации кератиноцитов. Проведены испытаний на лабораторных животных.Разработан способ оценки течения процесса раневого заживления методом определения состава и активности металлопротеаз.Выполнена корректировка конструкторской документации по результатам изготовления и предварительных испытаний действующего макета устройства для трансэндокардиальной доставки клеточного материала;Изготовлен опытный образец устройства для трансэндокардиальной доставки клеточного материала и проведение его предварительных испытаний.Разработан регламент для масштабного производства клеточных препаратов.
Развернуть
6
01.09.2009 - 30.11.2009
Разработаны несколько групп методов клеточной терапии: методы, нативные стволовые клетки, методы, использующие стволовые клетки, в которых запущенна программа превращения в нужный тип клеток, методы, использующие стволовые клетки, в которых встроены гены, повышающие их выживание и лечебную эффективность и методы использующие стволовые клетки, включенные в тканевые эквиваленты (кожный, дермальный, костный).Разработано оборудование для эндомиокардиального, безоперационного введения клеток
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2007-2013 годы"

Программное мероприятие

2.2 Осуществление комплексных проектов, в том числе разработка конкурентоспособных технологий, предназначенных для последующей коммерциализации в области наук о жизни
Тема
Использование стволовых и прогениторных клеток из соматических тканей человека для восстановительной терапии и регенерации тканей
Продолжительность работ
2007 - 2009, 30 мес.
Бюджетные средства
210 млн
Количество заявок
2
Тема
Разработка способа восстановления мужской репродуктивной функции с помощью аутологичных и аллогенных культур стволовых и прогениторных клеток.
Продолжительность работ
2009 - 2010, 17 мес.
Бюджетные средства
7 млн
Количество заявок
3
Тема
Механизмы направленной миграции и дифференцировки аутологичных прогениторных клеток при регенерации поврежденных тканей.
Продолжительность работ
2008, 3 мес.
Бюджетные средства
1,2 млн
Количество заявок
2
Тема
Метод восстановления эпителиально-мезенхимальных дефектов с помощью стволовых клеток
Продолжительность работ
2005 - 2006, 23 мес.
Бюджетные средства
7,5 млн
Количество заявок
5
Тема
Разработка методов модификации моноцитов периферической крови или стволовых клеток для повышения их регенеративного потенциала при аутологической трансплантации.
Продолжительность работ
2011 - 2012, 14 мес.
Бюджетные средства
24 млн
Количество заявок
5