Эксπир
Регистрация / Вход

Разработка электрохимического сенсора патогенной агрегации бета-амилоида при болезни Альцгеймера

Стадии проекта
Предложение принято
Конкурс завершен
Проект закончен
Проект
14.604.21.0074
Досье недоступно
Организация
ИБМХ
Руководитель работ
Супрун Елена Владимировна
Продолжительность работ
2014 - 2016, 30 мес.
Бюджетные средства
25 млн
Внебюджетные средства
6,5 млн

Создание новой продукции и технологий с целью создания конкретного образца (типа изделия, материала) или исследования особенностей его функционирования или применения

Этапы проекта

1
27.06.2014 - 31.12.2014
Для регистрации электрохимического сигнала бета-амилоида был выбран тирозин, окисляющийся при потенциале около 0.6 В. При разработке методики использовали бета-амилоид. Проведены эксперименты по выбору типа буферного раствора, оптимизации рН и электрохимических параметров регистрации сигнала. Построена градуировочная зависимость сигнала окисления бета-амилоида от концентрации в области 5е-7 – 5е-5 М. Опробована методика измерения электрохимического сигнала бета-амилоида за счет окисления остатка тирозина на нескольких тирозин-содержащих пептидах бета-амилоида с единичными аминокислотными заменами. Изучено влияние ионов металлов на электрохимический сигнал бета-амилоида. Выбрана графитовая паста фирмы Gwent для печати рабочего электрода сенсора. Изготовлены электроды двенадцати видов, различающиеся типом графитовой пасты (Gwent C2030519P4, ПУРП-0.05, ПУРП-ГП-Н) и количеством углеродной сажи. Показано, что добавление сажи приводит к значительному улучшению характеристик ПУРП-ГП-Н применительно к исследуемой реакции. Проведено подробное исследование аналитических характеристик окисления тирозина для паст Gwent C2030519P4 и ПУРП-ГП-Н с различным содержанием сажи. Показано, что наилучшими характеристиками при определении тирозина методом квадратно-волновой вольтамперометрии обладают электроды на основе немодицированной пасты Gwent. Синтезированы и очищены 6 типов модельных олигонуклеотидов с 5’-концевыми амино-, карбокси- и тиоловой функциональными группами и линкерами различной длины и природы. Синтезирован и очищен флуоресцентно-меченный олигонуклеотид (с FAM-группой на 5’-конце) для определения поверхностной плотности олигонуклеотидов, присоединённых к угольному электроду электрохимического сенсора. Установлено, что хроматографическая очистка синтетического бета-амилоидного пептида Абета(1-42) в щелочных условиях не вызывает модификаций аминокислотных остатков и повышает растворимость пептида в водно-солевом буфере с рН 7.0. Проведён анализ растворимости бета-амилоидных пептидов и сделан вывод, что синтетический пептид длиной 42 аминокислотных остатка, Абета, может быть получен в мономерной форме и использован для создания агрегационной модели.
Развернуть
2
01.01.2015 - 30.06.2015
Разработка методики контролируемой агрегации мономеров бета-амилоида.
  Разработка методики анализа размера и структуры агрегатов бета-амилоида.
  Разработка методики электрохимической регистрации агрегации бета-амилоида в растворе.
Оптимизация технологических условий и материалов печати графитовых электродов для детекции Разработка методики модификации поверхности сенсора олигонуклетидом.
  Разработка методики регистрации взаимодействий белок-олигонуклеотид на модельной системе тромбин/анти-тромбиновый аптамер.
Подготовка заявки на патент.
Развернуть
3
01.07.2015 - 31.12.2015
Разработан электрохимический сенсор агрегации бета-амилоида, представляющий собой графитовый электрод, модифицированный аптамером, селективным к олигомерам бета-амилоида. Разработан электрохимический способ анализа аминокислотных замен и модификаций в бета-амилоиде в отсутствие и в присутствие ионов Zn(II).
Развернуть
4
01.01.2016 - 30.06.2016
Изготовлены экспериментальные образцы (ЭО) электрохимических сенсоров агрегации бета-амилоида (Аβ42) и проведены их исследовательские испытания. Проведен синтез и очистка выбранных антиагрегационных препаратов.
Развернуть
5
01.07.2016 - 31.12.2016
Разработан электрохимический сенсор агрегации амилоида-бета (A?). Изготовлены экспериментальные образцы сенсоров агрегации и проведены их исследовательские испытания на 5 антиагрегационных препаратах пептидной природы, отобранных по литературным данным.
Развернуть

Программа

Программа "Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 2014-2020 годы"

Программное мероприятие

1.2 Проведение прикладных научных исследований для развития отраслей экономики
Продолжительность работ
2014 - 2015, 18 мес.
Бюджетные средства
9,4 млн
Организация
ИБГ УНЦ РАН
профинансировано
Продолжительность работ
2014 - 2016, 30 мес.
Бюджетные средства
25 млн
Организация
ИБР РАН
профинансировано
Продолжительность работ
2011 - 2013, 21 мес.
Бюджетные средства
7 млн
Организация
ИМБ РАН
профинансировано
Тема
Конкурсный отбор двухлетних прикладных научных исследований, направленных на создание продукции и технологий, по приоритетному направлению "Науки о жизни" в рамках мероприятия 1.2 Программы.
Продолжительность работ
2014 - 2015, 18 мес.
Бюджетные средства
300 млн
Количество заявок
85
Тема
Конкурсный отбор трехлетних прикладных научных исследований, направленных на создание продукции и технологий, по приоритетному направлению "Науки о жизни" в рамках мероприятия 1.2 Программы.
Продолжительность работ
2014 - 2016, 30 мес.
Бюджетные средства
780 млн
Количество заявок
233
Тема
Конкурсный отбор двухлетних прикладных научных исследований, направленных на создание продукции и технологий, по приоритетному направлению «Индустрия наносистем» в рамках мероприятия 1.2 Программы.
Продолжительность работ
2014 - 2015, 18 мес.
Бюджетные средства
300 млн
Количество заявок
105
Тема
Конкурсный отбор трехлетних прикладных научных исследований, направленных на создание продукции и технологий, по приоритетному направлению «Индустрия наносистем» в рамках мероприятия 1.2 Программы.
Продолжительность работ
2014 - 2016, 30 мес.
Бюджетные средства
780 млн
Количество заявок
249
Тема
Конкурсный отбор двухлетних прикладных научных исследований, направленных на создание продукции и технологий, по приоритетному направлению «Информационно-телекоммуникационные системы» в рамках мероприятия 1.2 Программы.
Продолжительность работ
2014 - 2015, 18 мес.
Бюджетные средства
200 млн
Количество заявок
87