Создание штаммов- продуцентов рекомбинантных гуманизированных Fab фрагментов к фактору некроза опухоли - альфа и предшественникам активных ангиотензинов.

Получены Fab фрагменты методом ограниченного протеолиза из антител против ФНО-а, которые обладают наивысшей аффинностью и нейтрализующей активностью. Определены Kd и IC 50 для Fab фрагментов. Получены Fab фрагменты методом ограниченного протеолиза из антител против ангиотензина 1, которые обладают наивысшей аффинностью и не имеют кросс-реактивности с ангиотензинами 2 и 3. Определены Kd для Fab фрагментов.

Проведены: клонирование генов тяжелых и легких цепей мышиных антител против фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-а) и ангиотензина 1 человека. Определены нуклеотидные последовательности; гуманизация мышиных антител; конструирование гибридных генов тяжелой и легкой цепей. Выполнено конструирование плазмид. Получены дрожжевые штаммы P.pastoris. Проведена физиологическая оптимизация процесса продукции рекомбинантных антител и отработка схемы выделения продукта из культуральной жидкости дрожжей. Разработаны программы и методики исследовательских испытаний: рекомбинантного гуманизованного антитела против фактора некроза опухоли- альфа, острой токсичности рекомбинантного гуманизованного антитела против предшественников активных ангиотензинов в экспериментах in vivo.

Наработаны препараты рекомбинантного гуманизированного антитела против фактора некроза опухали-альфа (ФНО-а) и ангиотензина 1 человека. Исследована нейтрализующая активность Fab-фрагментов в тестах in vitro с использованием культур клеток со следующими характеристиками: подверженность ФНО-а опосредованному апоптозу; способность усиливать экспрессию поверхностных молекул ICAM 1 в результате стимуляции ФНО-а. Проведены исследовательские испытания рекомбинантного гуманизованного антитела против фактора некроза опухоли- альфа.